На правах
рукописи
Аликберов
Шавкет Ахметович
СРАВНИТЕЛЬНОЕ
ИЗУЧЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ МЕТОДОВ ИММУНОДИАГНОСТИКИ
УРОГЕНИТАЛЬНОГО
ХЛАМИДИОЗА
14.00.46 –
клиническая лабораторная диагностика
14.00.36 –
аллергология и иммунология
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации
на соискание ученой степени
кандидата
медицинских наук
Саратов
– 2007
Работа
выполнена в Государственном образовательном
учреждении высшего профессионального
образования «Саратовский государственный
медицинский университет» Федерального
агентства по здравоохранению и социальному
развитию
Научные
руководители:
доктор
медицинских наук,
старший
научный сотрудник Федорова Валентина
Анатольевна
доктор
медицинских наук, профессор Елисеев Юрий
Юрьевич
Официальные
оппоненты:
доктор
медицинских наук, профессор Девдариани
Зураб Леванович
доктор
медицинских наук, профессор Гладилин
Геннадий Петрович
Ведущая
организация: Государственное образовательное
учреждение высшего профессионального
образования «Самарский государственный
медицинский университет» Федерального
агентства по здравоохранению и социальному
развитию
Защита
состоится “
”
2007 г. в
часов на заседании диссертационного
совета К.208.094.01 при ГОУ ВПО «Саратовский
ГМУ Росздрава» по адресу: (410012, Саратов,
ул. Большая Казачья, 112).
С диссертацией
можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО
«Саратовский ГМУ Росздрава» (410012, Саратов,
ул. Большая Казачья, 112).
Автореферат
разослан “
”
2007 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета
доктор медицинских
наук, профессор
Бородулин В.Б.
ОБЩАЯ
ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
АКТУАЛЬНОСТЬ
ПРОБЛЕМЫ. Хламидийные инфекции являются
серьезной проблемой национальных и международных
служб здравоохранения вследствие их
широкого распространения и выраженного
влияния на репродуктивное здоровье населения.
По данным многочисленных исследований,
уретральным хламидиозом поражено от
30 до 60% женщин и около 50% мужчин с негонококковыми
поражениями урогенитального тракта [Яцуха
с соавт., 1999; Адаскевич, 2001; Гасанова, 2001;
Гранитов, 2002; Кубанова, 2002; Прохоренков,
Шапран, 2002; Verkooyen et al., 2002; Watson et al.,
2002; Баткаев Э.А., Липова, 2004; Хрянин, 2004;
Бутов с соавт., 2005; Иванова, 2005, и др.].
В
большинстве случаев урогенитальный хламидиоз
(УГХ) протекает бессимптомно, по данным
ряда авторов [Robertson et al., 1988; Кяушас,
1990; Cengiz et al., 1992; Ремезов с соавт., 1995, 1996;
Скрипкин с соавт., 1996; Black, 1997; Морс с соавт.,
1998; Савичева, Башмакова, 1998; Chernesky et al.,
1998; Clad et al., 2000; Липова, 2002; Хрянин с соавт.,
2002, 2006; Козлова, Пухнер, 2003; Иванова, 2006],
у 40% женщин и 20 – 30% мужчин, что существенно
затрудняет диагностику и, следовательно,
способствует как распространению болезни,
так и развитию осложнений. В целом в настоящее
время среди наиболее распространенных
осложнений (эпидидимитов и сальпингитов)
выявляется не более 1 – 3% у мужчин и 15%
у женщин. Более того, выраженный полиморфизм
клинических проявлений, преобладание
хронических персистирующих форм хламидийной
инфекции и асимптомных, скрытых вариантов
течения на фоне большого количества микст
- инфекции урогенитального тракта также
осложняют клиническую диагностику хламидиоза,
поэтому в настоящее время, решающее значение
в обнаружении возбудителя хламидийной
инфекции отводят методам лабораторной
диагностики.
Хотя
для выявления Хламидии трахоматис (Chlamydia
trachomatis, C. trachomatis) разработано довольно
много диагностических тестов, в настоящее
время не существует единого алгоритма
в схеме диагностического обследования
пациентов с подозрением на хламидиоз.
В основном это связано с высокой зависимостью
результатов диагностики от выбора соответствующего
метода лабораторного исследования, адекватной
подготовки пациента к исследованию, правильного
забора материала и т. д. [Гомберг, Орлова,
1999; Cидорович с соавт., 2001; Поздняк с соавт.,
2002; Баткаев, Липова, 2004; Манзенюк с соавт.,
2004; Богуш, Скрипкин, 2005; Кузьмин, 2005; Федорова
с соавт., 2005; Stanczak et al., 2005; Хрянин с соавт.,
2006; Mania-Pramanik et al., 2006].
По
мнению большинства специалистов, нет
ни одного стопроцентно надежного теста
выявления хламидий, а предложенные методы
неравноценны по диагностической значимости
и могут быть использованы только в дополнение
один к другому из-за сложности интерпретации
результатов [Захаренко с соавт., 2001; Cидорович
с соавт., 2001; Шинский, 2001; Кубанова, 2002;
Хрянин, Лыкова, 2002; Баткаев, Липова, 2004].
В настоящее время используется пять групп
методов: морфологические, культуральные,
иммунологические, молекулярно-генетические
и серологические, среди которых наибольшее
распространение при массовых обследованиях
больных хламидиозом завоевали прямая
иммунофлуоресценция (ПИФ) и твердофазный
иммуноферментный анализ (ТИФА).
Как
известно, главным достоинством ПИФ является
возможность проведения прямой индикации
хламидий, визуально контролируемой в
люминесцентном микроскопе, в пораженных
клетках больного УГХ [Гомберг с соавт.,
1986; Cles et al., 1988; Deak et al., 1992; Askienazy-Elbhar, 1995;
Суворова, Куклин, 1996; Black, 1997; Скрипкин,
Мордовцева, 1999; Гранитов, 2002; Козлова,
Пухнер, 2003], что позволяет до сих пор считать
ее золотым стандартом, несмотря на меньшую
чувствительность и специфичность по
сравнению с культуральным методом [Гомберг
с соавт., 1986], особенно после замены поликлональных
антител к групповому орнитозному антигену,
липополисахариду (ЛПС) или МОМР (основному
белку наружной мембраны, от англ. Major outer
membrane protein) на моноклональные реагенты
[Caldwell et al., 1984; Batteiger et al., 1986; Cles et al., 1988; Ossewaarde
et al., 1988; Лысенко, 1993; Ni et al., 1995; Кутлин с
соавт., 1996; Федорова с соавт., 1997; Cидорович
с соавт., 2001; Cuffini et al., 2001; Muller-Loennies et al.,
2006]. Основным преимуществом ТИФА является
высокая информативность, простота технического
выполнения и регистрации результатов,
стабильность реагентов, относительная
дешевизна, особенно по сравнению с молекулярно-генетическими
методами, и возможность использования
для скрининговых исследований расширенного
контингента обследуемых за счет приборной
и объективной регистрации результатов
анализа. Особенно удобным ТИФА считается
при выявлении специфических антихламидийных
антител, в связи с чем он остается ведущим
методом для серологических исследований
данной инфекции [Мавров, 1987; Cengiz et al., 1992;
Deak et al., 1992; Назарова с соавт., 1996; Numazaki et
al., 1996; Askienazy-Elbhar, 2002; Jones et al., 2003; Банникова,
2004; Манзенюк с соавт., 2002, 2004; Федорова
с соавт., 2005]. В то же время диагностическая
значимость методов значительно варьируется
в зависимости от того, какие именно диагностические
тест-системы были использованы для клинического
лабораторного обследования пациентов,
что зачастую является принципиально
важным для практического здравоохранения.
ЦЕЛЬ
РАБОТЫ: сравнение эффективности и диагностической
значимости нескольких коммерческих тест-систем,
применяющихся для лабораторной диагностики
урогенитального хламидиоза и отличающихся
наибольшей чувствительностью и специфичностью,
– ПИФ на основе поликлональных антител
к специфическому орнитозному антигену
и моноклональных антител (МКА) к ЛПС C.
trachomatis и ТИФА для определения специфических
хламидийных антител классов G и A.
ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
- Провести
сравнительную оценку эффективности практического
использования иммунодиагностических
методов на основе поли- и моноклональных
антител для выявления антигенов C. trachomatis
у пациентов с УГХ и микст – инфекцией
урогенитального тракта.
- Исследовать
сыворотки пациентов с УГХ на наличие
или отсутствие специфических хламидийных
иммуноглобулинов классов G и A (IgG и IgA)
соответствующими коммерческими иммуноферментными
тест-системами. Определить диагностическую
эффективность указанных серологических
тестов в зависимости от стадии заболевания.
- Сравнить
диагностическую эффективность иммунодиагностических
методов, направленных на выявление антигенов
и специфических антител к C. trachomatis.
- С помощью
методов молекулярной иммунологии и иммунохимии
исследовать иммунореактивность и специфичность
сывороток больных УГХ с максимальным
титром специфических антител.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА.
Впервые проведено комплексное исследование
диагностической значимости четырех иммунодиагностических
методов лабораторной диагностики УГХ
(коммерческих тест-систем для ПИФ
«ХламиСкан» и «ХлаМоноСкрин» и ТИФА
«ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia
trachomatis IgG)» и «ИммуноКомб Хламидия трахоматис
(Chlamydia trachomatis IgA)») с использованием клинического
материала от пациентов с УГХ и микст –
инфекцией. Важным является получение
сведений о большей эффективности использования
ХламиСкана, основанного на обнаружении
специфического хламидийного антигена
(С-антигена) C. trachomatis с помощью гомологичных
поликлональных антител, по сравнению
с ХлаМоноСкрином, моноклональным реагентом,
направленным на обнаружение ЛПС возбудителя
хламидийной инфекции.
Показана важность комплексного
подхода, сочетающего параллельное применение
методов индикации и серодиагностики
данной инфекции, к обследованию пациентов
с УГХ. Доказана значительно большая информативность
иммуносерологических методов диагностики
больных УГХ независимо от формы заболевания,
особенно при определении специфических
хламидийных антител класса G.
По результатам различных
вариантов дот-иммуноанализа (ДИА) и иммуноблота
получены приоритетные данные о предоминировании
среди сывороточных антихламидийных иммуноглобулинов
у пациентов с УГХ на острой или прогрессирующей
стадиях заболевания антител к углеводному
компоненту С-антигена, при хроническом
течении антител к МОМР. Представлены
экспериментальные доказательства присутствия
в сыворотках пациентов с хроническим
УГХ антиидиотипических антител к МОМР
в детектируемых количествах при ТИФА.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
работы заключается в разработке алгоритмов
практического использования иммунодиагностических
тест-систем, направленных на обнаружение
специфических хламидийных антигенов
и антител у пациентов с УГХ. Полученные
в ходе исследования сведения о различной
диагностической ценности иммунодиагностических
тестов на разных стадиях заболевания
могут служить основой оптимизации схемы
лабораторной диагностики УГХ для повышения
эффективности выявления возбудителя
данной инфекции клиническими лабораториями
практического здравоохранения в РФ. По
результатам исследования разработаны
«Методические рекомендации по оценке
качества коммерческих иммунодиагностических
тест-систем», утвержденные ректором СГМУ
31.03.07 г. и предлагаемые к использованию
в практическом здравоохранении, на основе
определения их специфичности, чувствительности,
объективности, простоты и надежности
получения результатов и других критериев.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ,
ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
- Диагностические
флуоресцирующие поликлональные антитела
к поверхностному специфическому антигену
C. trachomatis (С-антигену) для реакции прямой
флуоресценции (ХламиСкан) позволяют более
эффективно выявлять гомологичный антиген
возбудителя УГХ в клиническом материале
пациентов с хламидийной инфекцией урогенитального
тракта по сравнению с диагностическими
флуоресцирующими хламидийными родоспецифическими
моноклональными антителами к ЛПС хламидий
(ХлаМоноСкрин).
- Параллельное
использование иммуноферментных тест-систем
для выявления IgG и IgA антител к Хламидии
трахоматис «ИммуноКомб Хламидия трахоматис
(Chlamydia trachomatis IgG и IgA)» является удобным
инструментом серодиагностики УГХ и позволяет
быстро идентифицировать этиологический
фактор у пациентов с хламидийной инфекцией
независимо от фазы инфекционного процесса.
При этом определение хламидийных иммуноглобулинов
класса G является более информативным.
- ХламиСкан
и ХлаМоноСкрин обеспечивают высокую
эффективность лабораторной диагностики
УГХ у пациентов в острый период заболевания
или на этапе прогрессирования хламидийной
инфекции, в то время как иммуноферментные
тест-системы «ИммуноКомб Хламидия трахоматис
(Chlamydia trachomatis IgG и IgA)» позволяют успешно
диагносцировать УГХ практически независимо
от стадии заболевания или его давности.
- Сыворотки
больных УГХ содержат различающиеся по
специфичности антитела. В острый период
среди сывороточных иммуноглобулинов
превалируют антитела к углеводному компоненту
С-антигена, при хроническом течении хламидийной
инфекции антитела к МОМР.
ВНЕДРЕНИЕ В ПРАКТИКУ
По теме диссертации опубликовано 8 научных
работ, из них 2 – е в рекомендованных
ВАК изданиях. Результаты исследования
используются в учебном и лечебно-диагностическом
процессах на кафедре клинической лабораторной
диагностики ФПК и ППС Саратовского государственного
медицинского университета, ГУЗ «Балаковский
кожно-венерологический диспансер» Министерства
здравоохранения и социальной поддержки
Саратовской области, МУЗ «Родильный дом»
г. Балакова и МУЗ «Центральная районная
поликлиника» г. Балакова.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ.
Материалы диссертации были представлены
на:
- VII Конгрессе
с международным участием (Кемер, Турция,
2005);
- Межрегиональной
конференции дерматовенерологов «Актуальные
вопросы дерматовенерологии», посвященной
1000-летию г. Казани (Казань, 2005);
- VIII Конгрессе
«Паллиативная медицина» (Египет, 2006);
- X Всероссийской
конференции дерматовенерологов «Организация
оказания дерматовенерологической помощи
в современных условиях», посвященной
85-летию ЦКВИ (Москва, 2006);
- II Съезде
врачей медико-профилактического профиля
Вооруженных сил Российской Федерации
«Современные проблемы военной профилактической
медицины, пути их решения и перспективы
развития» (Санкт-Петербург, 2006);
- 3-й бинарной
научной конференции научного общества
хламидиологов США по фундаментальным
исследованиям (CBRS), Луисвилл, Кентукки,
США, 2007.
ОБЪЕМ
И СТРУКТУРА РАБОТЫ. Диссертация состоит
из введения, обзора литературы (2 главы),
собственных исследований (4 главы), заключения,
выводов и списка литературы, включающего
303 источника, из них зарубежных – 167. Объем
диссертации составляет 161 машинописных
страниц, в том числе, 10 рисунков и 12 таблиц
СОДЕРЖАНИЕ
РАБОТЫ
МАТЕРИАЛЫ
И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для
исследования были использованы 245 образцов
от пациентов с клиническими проявлениями
хламидийной урогенитальной инфекции,
с января 2005 года по июнь 2007 года, обратившихся
для обследования самостоятельно или
по направлению из других медучреждений
в Государственное учреждение здравоохранения
«Балаковский кожно-венерологический
диспансер» Министерства здравоохранения
и социального развития Саратовской области.
В контрольную группу включили больных
другими кожными и венерическими заболеваниями
и заведомо здоровых доноров (всего 108
человек).
Материалом
для лабораторного анализа служили уретральные
и цервикальные соскобы, а также сыворотки
крови обследуемых. Взятие материала из
уретры и цервикального канала осуществляли
с помощью одноразовых универсальных
зондов (НПО «ЛабДиагностика», Россия),
а сыворотки крови получали с помощью
системы одноразового забора крови «Вакуэт»
с учетом инструкций, предлагаемых фирмами
– производителями соответствующих тест-систем.
Образцы
от каждого пациента (сыворотки крови
и уретральные соскобы) одновременно исследовали
в четырех коммерческих тест-системах.
Для реакции ПИФ, основанной на методе
флуоресцирующих антител, использовали
ХламиСкан с диагностическими флуоресцирующими
поликлональными антителами к поверхностному
специфическому антигену C. trachomatis, С-антигену
(производство ООО «БТК ЛАБдиагностика»,
Москва), и ХлаМоноСкрин с диагностическими
флуоресцирующими хламидийными родоспецифическими
моноклональными антителами к ЛПС хламидий
(производство ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС», Москва).
Для выявления IgG и IgA антител к C. trachomatis
в ТИФА, применяли ИммуноКомб Хламидия
трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG и IgA) производства
ЗАО «БИОГРАД», Санкт-Петербург.
Клинико-лабораторное
обследование включало также физикальный
осмотр и сбор анамнестических данных.
Чувствительность ХламиСкана и ХлаМоноСкрина
определяли относительно культурального
метода, как предложено ранее [Чеботарев,
1998; Кузьмин, 2005]. Сравнительную эффективность
практического использования иммунодиагностических
тест-систем в клиническом материале обследуемых
нами лиц проводили с применением комплексного
анализа обобщенных клинико-анамнестических
данных (наличия или отсутствия клинических
проявлений, жалоб, особенностей выявления
пациентов и т. д.) аналогично [Бойцов с
соавт., 2002; Хрянин, 2004].
Специфичность
и активность сывороток пациентов изучали
в непрямом варианте ТИФА с применением
в качестве сенситина стандартного орнитозного
антигена (С-антигена), полученного из
инфицированных желточных мешков куриных
эмбрионов методом эфирно-ацетоновой
экстракции и инактивированного прогреванием
на водяной бане в течение 30 мин. с использованием
в качестве консерванта мертиолята натрия,
как описано ранее [Федорова с соавт., 2005].
Для изучения сравнительной иммунореактивности
сывороточных Ig обследуемых людей использовали
непрямой ДИА с С-антигеном, нативным или
депротеинизированным по методу P.J. Hitchcock
и T.M. Brown [1983], а также ксеногенные сыворотки
к С-антигену, полученные и охарактеризованные
ранее [Федорова с соавт., 2005], или коммерческие
препараты IgM, IgG и IgA. Природу лиганда, комплементарного
сывороточным антителам пациентов с УГХ,
изучали согласно рекомендациям M. Brockhaus
с соавт. [1981] и M.Z. Atassi [1984].
Электрофоретическое
разделение С-антигена проводили в 12,5%
-- ном полиакриламидном геле, содержащем
додецилсульфат натрия, по методу U.K. Laemmli
[1970]. Иммунореактивность сывороток обследуемых
людей изучали в иммуноблоттинге [Towbin
et al., 1984] при помощи аппарата для полусухого
блотта с графитовыми электродами. Для
проявления нитроцеллюлозных реплик применяли
антивидовой пероксидазный конъюгат против
иммуноглобулинов человека производства
НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи в рабочем разведении.
Хромогенным субстратом служил диаминобензидин.
Статистический
анализ полученных результатов проводили
по И.А. Ашмарину и А.А. Воробьеву [1962].
РЕЗУЛЬТАТЫ
СОБСТВЕННЫХ НАБЛЮДЕНИЙ
И
ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Краткие
демографические данные обследованных
нами людей представлены в табл. 1.
Согласно
анализу демографических показателей
средний возраст обследованных нами людей
не превышал 40 лет (от 23 до 67 лет), подавляющее
число проживало в городе, причем работающих
среди них оказалось в 1,72 раза больше,
чем не работающих. Мужчин было в 1,58 раза
больше, чем женщин. Количество состоящих
в браке в 2,5 раза превышало число одиноких
людей.
На первом этапе проводили
сравнение чувствительности двух коммерческих
тест-систем для ПИФ «ХламиСкан» и «ХлаМоноСкрин»,
основанных соответственно на применении
диагностических флуоресцирующих поликлональных
антител к поверхностному специфическому
антигену C. trachomatis (С-антигену) и диагностических
флуоресцирующих хламидийных родоспецифических
моноклональных антител к ЛПС хламидий.
Объектом исследования служили клинические
образцы уретрального и вагинального
отделяемого.
Таблица
1
Основные
демографические показатели
лиц, обследованных иммунодиагностическими
методами
Название
демографического показателя |
Показатель,
чел. (n = 245) |
Средний
возраст |
37,88 ± 6,93 |
Пол (%):
мужчины
женщины |
61,23 ± 6,96
38,78 ± 6,96 |
Место
жительства (%):
город
село |
93,87 ± 3,42
6,12 ± 3,42 |
Социальный
статус:
работающие
не работающие |
63,26 ± 6,89
36,74 ± 6,89 |
Семейное
положение:
в браке
холост,
разведен |
71,43 ± 6,45
28,57 ± 6,45 |
Оказалось,
что с помощью поликлонального иммунодиагностикума
выявлялось большее количество (26,53%) позитивных
результатов, тогда как с помощью моноклонального
– только 20,4%, т. е. в ХламиСкане регистрировалось
больше (в 1,3 раза) положительных ответов,
чем в ХлаМоноСкрине. Совпадение двух
использованных нами иммунотестов отмечалось
в 16,52% случаев. Чувствительность ХламиСкана
относительно культурального метода,
по литературным данным [Чеботарев, 1998;
Кузьмин, 2005], составляет 90 – 95%, а иногда
доходит до 98%. Чувствительность ХлаМоноСкрина
и ХламиСкана относительно культурального
метода, по нашим данным, оказалась на
уровне 76,89% и 75,35% соответственно.
При
изучении сравнительной эффективности
применения двух иммунодиагностических
тест-систем для обнаружения антигенов
C. trachomatis в клиническом материале обследуемых
нами лиц установлено, что большая часть
людей обратилась или была направлена
на обследование впервые (табл. 2). Из них
12,25% людей по направлению от специалистов
разного профиля, в том числе при проведении
профосмотров. Хотя количество положительных
ответов при параллельном исследовании
клинических образцов ХламиСканом и ХлаМоноСкрином
совпадало с наличием или отсутствием
клинических проявлений УГХ (совпадение
в каждом иммунотесте – 100%), ХламиСканом
регистрировалось в 1,2 раза больше позитивных
случаев.
В
ХламиСкане диагностическая значимость
положительного результата составила
63,16%, отрицательного результата – 36,84%.
В 2,04% случаев регистрировался ложноположительный
результат, когда в этом варианте ПИФ фиксировался
положительный сигнал, но при дальнейшем
обследовании этих пациентов диагноз
УГХ не подтвердился.
В
ХлаМоноСкрине диагностическая значимость
положительного результата была несколько
меньшей – 52,63%, отрицательного результата
– 47,37%. Однако в этом варианте иммуноанализа
наблюдалось довольно много ложноотрицательных
результатов (в 1,2 раза больше, чем в ХламиСкане),
когда специфический антиген C. trachomatis
у больных с УГХ выявлен не был.
Еще
более явные различия в эффективности
использования поликлонального и моноклонального
иммунодиагностикумов были зафиксированы
нами при анализе клинических образцов
пациентов с микст – инфекцией урогенитального
тракта. При анализе частоты встречаемости
моно- и микст – инфекции у больных с УГХ
оказалось, что только хламидийная инфекция
урогенитального тракта наблюдалась у
73,69% пациентов, тогда как ее сочетание
с другими ИППП (трихомоноз, вагиноз, кандидоз)
– у 26,32%. В целом ХламиСканом было выявлено
в 1,67 раза больше положительных ответов,
чем ХлаМоноСкрином, причем в 100% случаев
наблюдалось совпадение с диагнозом УГХ
как по положительным, так и по отрицательным
ответам. Диагностическая значимость
положительного ответа в ХлаМоноСкрине
не превышала 60%, отрицательного – 40%. Однако
положительные результаты этого теста
в 100% случаев совпадали с диагнозом УГХ.
На следующем этапе
нами проведено исследование сывороток
всех обследуемых людей на наличие или
отсутствие специфических хламидийных
антител с использованием двух иммунодиагностических
иммуноферментных тест-систем – «ИммуноКомб
Хламидия трахоматис (Chlamydia trachomatis IgG)»
и «ИммуноКомб Хламидия трахоматис (Chlamydia
trachomatis IgA)». Оказалось, что сыворотки половины
из них (57,14%) давали положительную реакцию
в одной или обеих тест-системах. Их них
92,86% людей, по данным соответствующего
теста, имели в детектируемом количестве
IgG и 42,86% – IgA. От общего количества обследованных
специфические хламидийные антитела регистрировались
у 53,06% (IgG) и 24,49% (IgA).
Таблица
2
Совпадение
положительных результатов ПИФ с клинико-анамнестическими
данными обследованных людей с подозрением
на УГХ
Основной
параметр |
Количество
пациентов
(%) |
Совпадение
по количеству позитивных ответов
(%)
с ПИФ |
ХламиСкан |
ХлаМоноСкрин |
Самообращение:
первично
повторно |
83,67
97,96
2,04 |
22,45 |
18,36 |
По
направлению |
16,33 |
0 |
0 |
Причина
обращения:
наличие жалоб,
клинических проявлений;
отсутствие симптоматики |
67,35
32,65 |
18,36
81,64 |
18,36
81,64
|
Клинико-лабораторный
диагноз |
40,8 |
24,49* / 63,16** |
20,41* / 52,63** |
* – количество
позитивных ответов от общего количества
обследованных.
**
– количество позитивных ответов от
количества пациентов с окончательным
диагнозом.
Совпадение
по положительным результатам между двумя
иммунотестами составило 20,41% всех обследованных
или 35,72% пациентов, содержащих, по данным
тест-систем ТИФА, хламидийные антитела
обоих классов. По отрицательным результатам
выявлено 42,86% совладений от общего количества
исследованных нами проб.
Сыворотки
48,97% всех обследованных людей (85,72% серопозитивных
пациентов) давали положительную реакцию
в обоих вариантах ТИФА в диагностическом
титре (≥ 1 : 32). Поскольку уровень специфических
хламидийных антител указанных классов
значительно варьировался, при анализе
полученных данных нами было условно сформировано
5 групп. В первые четыре были объединены
пациенты, сыворотки которых, по данным
иммунотестов, содержали хламидийные
антитела в разных титрах: 1-я – низкий
уровень IgA (1 : 8), отсутствие IgG – 7%; 2-я –
невысокий уровень IgA (1 : 8 – 1 : 16), диагностические
значения (1 : 32 – 1 : 128) IgG – 28%; 3-я – диагностически
значимые уровни IgA (1 : 32) и IgG (1 : 32 – 1 : 128)
– 8%; 4-я – отсутствие IgA, высокий уровень
(1 : 16 – 1 : 128) IgG – 57%. Пятую группу (23,8%) составили
пациенты с негативными результатами
в обоих вариантах ТИФА, у которых, по данным
ХламиСкана, ХлаМоноСкрина или обоих тестов
одновременно, определялся специфический
антиген C. trachomatis.
При
последующем сопоставлении результатов,
полученных нами методами индикации и
серодиагностики УГХ, оказалось, что у
21,42% обследованных людей специфические
хламидийные антигены и антитела одновременно
определялись всеми использованными в
настоящем исследовании иммунодиагностикумами,
у 7,14% – на фоне присутствия специфических
хламидийных антител специфический антиген
C. trachomatis был выявлен одной из тест-систем
ПИФ, у 17,85% серопозитивных пациентов с
УГХ оба метода индикации антигенов возбудителя
этой инфекции были негативными. В то же
время 46,43% людей, по данным ТИФА, обладали
хламидийными антителами в диагностических
титрах, хотя у них и отсутствовали другие
признаки УГХ и ни одним из использованных
нами методов не определялись специфические
хламидийные антигены, т. е. регистрировались
ложноположительные результаты аналогично
наблюдениям других специалистов [Freidank,
Holtje, 1996]. Среди серопозитивных лиц 78,57%
имели жалобы на боли, выделения из уретры
и т. д., однако только 59,09% был поставлен
диагноз УГХ.
Самостоятельно
75% людей обратили