Прямые методы:
- обнаружение боррелий с помощью темнопольной микроскопии (применяется
для определения спонтанной инфицированности клещей боррелиями
(исследуется гемолимфа и содержимое кишечника клеща));
- культивирование боррелий на питательных средах;
- полимеразная цепная реакция для обнаружения специфической ДНК (чувствительность не превышает 20%).
Косвенные методы – направлены на определение антител в организме больного:
- ИФА
- РНИФ (диагностический титр – 1:64)
- вестерн-иммуноблоттинг (Western-blot)
Результативность диагностических тестов зависит от модификации,
используемого антигена (геновида), от формы и стадии болезни, от
предшествующего лечения антибиотиками.
Следует внимательно подходить к интерпретации полученных результатов (табл. 1, 2).
Причины ложноположительных результатов
| Перекрестные
антигены |
Инфекционные причины:
- сифилис
- лептоспироз
- возвратный тиф
- лихорадка Скалистых Гор
- инфекции, вызванные ЦМВ, ВЭБ, VZV
- туберкулез
- представители нормальной микрофлоры полости рта |
| Неинфекционные причины:
- аутоиммунные заболевания: ревматоидный артрит, диффузные заболевания соединительной ткани
- рассеянный склероз
- неопрастические процессы
- саркоидоз |
Неопределенные (сомнительные) результаты возможны при взаимодействии
белков боррелий с белками Y.enterocolitica O3, E.coli, C.jejuni,
N.meningitidis, H.influenze, пневмококков, стафилококков,
M.tuberculosis.
Причины ложноотрицательных результатов:
- иммунодепрессивные состояния (неопрастические процессы, СПИД);
- ранние стадии КБ (на первой стадии антитела методом РНИФ выявляются
только у 20%) или поздняя стадия (в 3-й стадии, как и при сифилисе,
антитела (АТ) могут не обнаруживаться);
- использование диагностических тест-систем с ограниченным набором
антигенов (только, OspA), а у боррелий, персистирующих в организме
человека, эти белки отсутствуют
Характеристика гуморального иммунного ответа при КБ
| Стадия |
Иммунный ответ |
| I – ранняя/локализованная инфекция |
Начальный ответ IgM (с третьей недели с
момента инфицирования) с последующим появлением IgG антител (с 6-й
недели с момента инфирования). Часто выявляется серонегативность. IgM
антитела часто не определяются при короткой длительности инфекции |
| II – ранняя диссеминированная инфекция |
Иммунный ответ аналогичен таковому на
стадии I, с преобладанием IgG антител. Продукция интратекальных
антител при нейроборрелиозе. |
| III – поздняя/персистирующая инфекция |
Как правило высокие титры IgG антител при
артрите и акродерматите. IgM антитела обычно не выявляются. Продукция
интратекальных антител при хроническом нейроборрелиозе. |
Если у пациента при неоднократных исследованиях постоянно
обнаруживаются IgM (без сероконверсии), то это следует расценивать как
ложноположительный результат.
| 