|
|
| Клиническая лабораторная диагностика |
 |
Лабораторная диагностика гнойных бактериальных менингитов
| Для проведения наиболее
результативного лабораторного исследования в бактериологическую
лабораторию как можно быстрее, незамедлительно после отбора материала,
только в теплом виде с соблюдением режима стерильности доставляется
патологический материал в следующем виде. Ликвор: 1) в стерильной
пробирке в количестве 1—1,5 мл для бактериоскопии, серологических
исследований и посева; 2) засеянный непосредственно у постели больного
при пункции на чашку с "шоколадным" агаром; 3) засеянный
непосредственно у постели больного при пункции в 0,1% сывороточный
полужидкий агар. Кровь: 1) засеянная непосредственно у постели больного
в двухфазную питательную среду. Плотная фаза этой питательной среды —
"шоколадный" агар, а жидкая — сахарный бульон на переваре Хоттингера.
Соотношение крови и жидкой фазы 1:10; 2) для серологических реакций
(встречный иммуноэлектрофорез — ВИЭФ, реакция непрямой гемагглютинации
— РНГА с парными сыворотками и др.); 3) для проведения
бактериоскопического исследования в виде "толстой капли" на стекле.
Следует помнить о том, что если материал отбирали во внеурочное для
лаборатории время (ночью, в выходные или праздничные дни), то его
обязательно нужно хранить до доставки в лабораторию в условиях
термостата. В основе методологического оснащения исследований лежит
принцип применения высокоэффективных, доступных, легковоспроизводимых
культуральных и некультуральных методов лабораторной диагностики.
Первый результат можно получить при микроскопическом исследовании
окрашенного препарата из нативного ликвора. Этот метод имеет
определенные преимущества из-за быстроты и простоты воспроизведения,
особенно при наличии в препарате морфологически четких микробных
клеток, однако ему присущи и серьезные недостатки: морфология
микроорганизмов не всегда четко выражена, особенно при менингококковом
менингите, когда даже в тяжелых случаях при гнойном ликворе найти
морфологически четкие микробные клетки не представляется возможным и
приходится указывать на отрицательный результат данных бактериоскопии.
Кроме того, на интерпретацию результатов бактериоскопии влияют элемент
субъективизма, а также разрешающая способность и качество микроскопов.
Данные микроскопии чрезвычайно важны и необходимы, но метод из-за
субъективизма следует отнести к категории ориентировочных и
использовать только в комплексе с другими методами исследования.
Классический метод культурального посева остается "золотым стандартом"
для такого рода иссле-дований. Универсальная питательная среда — это
"шоколадный" агар с обязательным его обогащением факторами роста
(поливитекс, гемоглобин, изовиталекс и др.). Расход добавок небольшой,
эффективность их для культивирования требовательных к питательным
средам микроорганизмов чрезвычайно высокая. На обогащеной "шоколадной"
среде успешно культивируются все основные возбудители ГБМ —
менингококки, пневмококки и гемофильные палочки типа Ь, а также многие
другие, не основные возбудители ГБМ. Следует, однако, отметить, что
возможности культуральной диагностики ограничены. Основным некультуральным легковоспроизводимым экспресс-методом
лабораторной диагностики ГБМ является реакция латекс-агглютинации,
которая позволяет в течение 15—30 мин обнаруживать специфические
антигены основных возбудителей ГБМ в ликворе (Кит-5, "Биомерье",
Франция) или крови (Менингитис комбо тест кит "ББЛ", США). Кроме того,
представляется чрезвычайно эффективным использование ВИЭФ для
обнаружения специфических антигенов в ликворе и крови, а также РНГА для
обнаружения нарастания титров специфических антител в парных сыворотках
крови к менингококкам серогрупп А, В, С. В последние годы все большее
распространение получает полимеразная цепная реакция. Обязательной
процедурой является посев крови на двухфазную питательную среду с
инкубацией системы в течение 7 дней или до получения положительного
результата в отношении роста культуры, а также бактериоскопия "толстой
капли" крови с выявлением морфологически четких микробных клеток.
Идентификация выделенных культур проводится согласно
нормативно-методическим документам (приказ № 375, РФ), а также с
использованием современных идентификационных мини-систем API NH
("Биомерье", Франция) для идентификации менингококков и гемофильных
палочек и ID 32 STREP ("Биомерье", Франция) для идентификации
пневмококков. Эти мини-системы позволяют в течение 2—4 ч изучить
метаболические и ферментативные свойства культур и сделать заключение
об их видовой принадлежности. Все выделенные от больных штаммы (СМЖ и
кровь) исследуются на чувствительность к антибактериальным препаратам
для выбора оптимального лекарственного препарата. В условиях
практических микробиологических лабораторий наиболее удобным является
дискодиффузионный метод. Кроме того, в настоящее время все более
широкое распространение получает определение антибиотикограммы штаммов
с помощью мини-систем АТВ NH (для изучения менингококков и гемофильных
палочек) и АТВ STREP (для изучения пневмококков и стрептококков). С
помощью этих мини-систем можно определить чувствительность штаммов
одновременно более чем к 15 антибактериальным препаратам.
|
|
|
| Просмотров: 1822
|
|
|